Estudio del concetrado de leucocitos y indice leucocitario

 Estudio del concentrado de leucocitos y índice leucocitario

 

Fundamento: 

En algunas circunstancias esta indicada la obtención de un concentrado de leucocitos, Entre ellas cabe destacar las siguientes:

• Obtención y estudio microscópico de células patológicas en una leucopenia.
• Obtención de células en una leucopenia para la realización de pruebas citoquímicas.
• Obtención de células para la búsqueda del corpusculo de Barr. Esto se porduce por la condensación del material genético inactivado de un cromosoma X.

Cuando se centrifuga sangre anticoagulada a una velocidad y durante un tiempo adecuado, se obtienen 3 capas o fracciones. 

• En la capa inferior, de color rojo, están presentes los eritrocitos.
• La capa media, de color blanco y escaso espesor, esta formada por leucocitos y plaquetas.
• La capa superior, transparente y de color ambarino, es el plasma.

Material: 

• Capilares.
• Portaobjetos. 
• Pipeta pasteur.
• Vaso de precipitado.
• Papel de filtro
• Microscopio.
• Piseta. 
• Centrífuga.
• Tubo de centrífuga

Reactivos: 

• Solución nº1: Solución alcohólica de triarilmetano.
• Solución nº2: Solución  tamponada de xanteno.
• Solución nº3: Solución tamponada de tiazina.
• Sangre anticoagualada.

Procedimiento:

1. Mezclamos la sangre y el anticoagulante.
2. Centrifugamos la sangre anticoagulada a 1500 rpm durante 15 minutos.
3. Retiramos el sobrenadante obtenido que corresponde al plasma.
4. Recogemos 0,2 ml a 0,3 ml de la capa leucoplaquetaria, con cuidado de no recoger ninguna porción de la capa eritrocitaria.
5. Extender varios gotas de la capa leucoplaquetaria sobre un portaobjetos.
6. Teñir el frotis meidante una técnica hematológica tradicional, en nuestro caso ha sido la tinción de panóptico rápido.
7. Visualizar con el microscopio a 100x utilizando aceite de inmersión.

Lectura de resultados

La observación microscópica del frotis preparado a partir de la capa leucoplaquetaria permite el estudio de numerosos leucocitos de todos los tipos. Además, facilita la visualización de múltiples plaquetas.

 

Hemos calculado el IL al contar 50 neutrofilos y el resultado ha sido el siguiente:

IL= 146/50= 2,92 El IL normal está comprendido entre 1,9 y 3, por lo que este resultado entra dentro de los límites de normalidad. 

Calculamos también el índice de schilling y el resultado ha sido el siguiente:

Índice de Schilling= 2/98=0,02 desviación a la derecha

Observaciones: 

• Utilizar sangre anticoagulada. 
• Homogeneizar la sangre, antes de realizar la extensión.
• Introducir la extensión en las diferentes soluciones, en el orden adecuado, para que la tinción se realice de forma adecuada.
• Tener cuidado, al retirar el plasma, para no retirar también la capa leucoplaquetaria, ya que con ella vamos a realizar la extensión.
• Centrifugar a 1500 revoluciones por minuto, durante 15 minutos, para obtener la capa leucoplaquetaria, para poder realizar la práctica.
• Fijarnos en que el estado del portaobjetos sea el adecuado para realizar la extensión.
  

Normas de prevención: 

• Utilizar los EPIS correspondientes, para realizar la práctica.
• Depositar los residuos generados durante la realización de la práctica, en los contenedores adecuados.
• Limpiar, desinfectar y esterilizar los materiales utilizados cuando terminos de realizar la práctica. 
• Tener precaución al trabajar con la sangre, para que no nos salpique y pueda entrar en contacto con alguna herida.

 

 

Actividades

1º ¿ Cómo se llama la condensación de material genético inactivado de un cromosoma X?

Corpúsculo de Barr.

2º ¿Qué otro nombre recibe la capa leucoplaquetaria?

Buffy coat

3º Tras centrifugar la sangre ¿ en qué capa se sitúan los hematíes?

En la capa inferior