Recuento de reticulocitos

 Recuento de reticulocitos

 

Fundamento: Podemos observar los reticulocitos con el microscopio, utilizando la tinción azul cresil brillante. Este colorante produce la precipitación de los restos de ARN, observándolos como filamentos de color azul intenso en el interior de la célula.

Según el grado de maduración del reticulocito, podremos ver un modelo de reticulocito distinto, de ovillo denso en el caso de reticulocitos inmaduros o de granulos escasos para los más maduros.

Material: 

• Microscopio.
• Papel de filtro.
• Tubos de hemolisis.
• Pipetas pasteur.
• Portas.
• Baño maría.
• Papel parafilm. 

Reactivos:  

• Azul de cresil brillante.
• Agua destilada.
• Aceite de inmersión. 
• Sangre anticoagulada con EDTA.

Procedimiento:

1. Preparamos todos los materiales.
2. Realizamos la tinción de reticulocitos: Para ello añadimos 3 gotas de azul de cresil brillante y 3 gotas de sangre total, previamente homogeneizada. Mezclamos y tapamos con papel de parafilm, lo introducimos en el baño maría a 37ºC durante 5 minutos. Cuando pasen los 5 minutos volvemos a homogeneizar y tomamos una gota de la suspensión y la colocamos sobre un portaobjetos, realizamos la extensión y la dejamos secar.

Lectura:  

Depositamos una gota de aceite de inmersión y observamos la extensión a 100x.

Los hematíes se habrán teñido de color verde amarillento y los reticulocitos se diferencian porque en su interior veremos unos hilos finos de color azul.

Contamos 2000 hematíes y calculamos el porcentaje de reticulocitos:

%reticulocitos= Nº de reticulos contados 

                          --------------------------------- x 100 

                          Nº de hematíes contados

Interpretación de los resultados:

En adultos y niños los valores normales están entre 0,5% y 2%. 

Se produce reticulopenia, en casos de aplesia medular, anemia ferropénica, anemia megaloblástica y anemias con dificultad de eritropoyesis.

Hay reticulocitosis en casos de anemias hemolíticas y post-hemorragías, en las que la médula ósea aumenta en nivel de producción de hematíes para contrarrestar su pérdida

Ejercicios: 

1º) ¿ Qué son los reticulocitos?

Son eritrocitos que aún no han alcanzado la madurez, en cuyo interior aun quedán restos de ARN ribosómico, el cuál se puede ver utilizando la tinción azul cresil brillante.

2º)  ¿ Qué tipo de tinción estamos utilizando? 

Azul de cresil brillante.

3º) ¿ Por qué hacemos la correción del porcentaje  de reticulocitosis?

Para corregir el valor de % de reticulocitos, cuando el número de hematíes es muy alto o el número de hematíes maduros esta disminuido.

4º) ¿ Qué nos expresa el IPR?

Los días que tarda en madurar el eritrocito en sangre periférica.