Tinción de Wright
Tinción de Wright
Fundamento: El colorante utilizado es una solución de eosina-azul de metileno y azur B junto con otros derivador del alcohol metílico.
Al haber metanol en el colorante no es necesario realizar una fijación antes de la coloración, solo se va a realizar la fijación si se van a conservar las extensiones sin teñir.
Material:
- Microscopio.
- Cristalizador.
- Puentes de tinción.
- Pipeta pasteur.
- Piseta.
- Papel de filtro.
- Guantes.
- Bata.
- Tubos de ensayo.
- Gradilla.
Reactivos:
- Solución de eosina-azul de metileno según Wright.
- Solución tampón de pH 7,2.
- Aceite de inmersión.
- Sangre capilar o venosa anticoagulada. Los anticoagulantes mas utilizados son la heparina y el EDTA.
Procedimiento:
- Realizar un frotis sanguíneo y dejarlo secar.
- Colocamos la extensión de forma horizontal sobre el puente de tinción, y vertemos sobre ella 1ml de eosina-azul de metileno. Lo dejamos secar 1 minuto y lavamos con una solución tampón de pH 7,2. Dejamos escurrir y lo secamos en posición vertical.
- Diluimos en un tubo de ensayo 0,5 ml de eosina-azul de metileno con 0,5 ml de solución tampón pH 7,2. Mezclamos y cubrimos con esta dilución la extensión. Esperamos 3-5 minutos y lavamos con agua del grifo. Volvemos a lavar con solución tampón pH 7,2, dejamos escurrir y secar en posición vertical.
Interpretación de los resultados:
Depositamos sobre la extensión una gota de aceite de inmersión y observamos la extensión con el objetivo a 100x.
Los eritrocitos se tiñén de color rosa y las plaquetas de color violeta rojizo.
Los eosinófilos se observan con el núcleo azul violeta, el citoplasma azul y los gránulos de color rojo anaranjado.
Los basófilos presentan un núcleo de color púrpura y granulación de color azul oscuro.
Los monocitos y linfocitos se observan con un núcleo de color violeta y el citoplasma azul, un poco más claro en el monocito.
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