Fórmula leucocitaria

 Fórmula leucocitaria

 

Fundamento:

La formula leucocitaria o recuento diferencial leucocitario consiste en la determinación del porcentaje que representa cada uno de los tipos de leucocitos con respecto al total de ellos.

Material:

• Capilares.
• Portaobjetos. 
• Pipeta pasteur.
• Vaso de precipitado.
• Papel de filtro
• Microscopio.
• Piseta.
  

Reactivos: 

• Solución nº1: Solución alcohólica de triarilmetano.
• Solución nº2: Solución  tamponada de xanteno.
• Solución nº3: Solución tamponada de tiazina.
• Sangre anticoagualada.

Procedimiento:

1. Realizamos el mismo procedimiento que en la técnica de panóptico rápido, para ello realizamos una extensión sanguínea.
2. Sumergimos la extensión en la solución nº1, 5 veces, cada una de esas veces 5 segundos, y escurrimos.
3. Realizamos el mismo procedimiento que en el anterior paso, pero con las soluciones 2 y 3.
4. Observamos la extensión con el microscopio a 100x , utilizando el aceite de inmersión.
5. Observamos la zona mientras se realiza un recorrido en forma de almenas o de greca. Al mismo tiempo se clasifican  y se cuentan los leucocitos que se van a encontrar a lo largo de ese recorrido.
6. Una vez contados calculamos el porcentaje de cada uno de los leucocitos con el regulador automático de células.
   

 

Lectura de resultados: 

 Cuanto mayor es el número de leucocitos contados, más exacta es la determinación. Sin embargo en la práctica solo se cuentan 100 leucocitos o 200.

Si se encuentra un mayor número de linfocitos que de neutrófilos o más de un 10% de eosinófilos o más de un 12% de monocitos, el RDL se hace contando 200 leucocitos y dividiendo , el resultado obtenido entre 2.

Si se conoce el WBC de la sangre se puede calcular el número de cada uno de los tipos de leucocitos que estan presentes en mm₃ de sangre, mediante la siguiente fórmula.

nº TL= WBC x TL/100 x 20 x D

Nosotros hemos realizado el recuento de 2 extensiones y hemos obtenido los siguientes resultados:

Extensión 1: 

• Neutrófilos segmentados: 8, 30%
  
• Neutrófilos encayados 1,3,8%
• Linfocitos: 8, 30%
• Monocitos 1, 3,8%
• Eosinofilos 0
• Basofilos: 3, 11,5%
• Linfocitos activados: 6,23%

número de neutrófilos segmentados por mm₃ de sangre= 4675x30/100= 1402 neutrófilos segmentados

número de neutrófilos encayados por mm₃ de sangre=  4675x3,8/100= 178 neutrófilos encayados

número de linfocitos por mm₃ de sangre=  4675x30/100= 1402 linfocitos

número de monocitos por mm₃ de sangre=  4675x3,8/100= 178 monocitos

número de basófilos por mm₃ de sangre=  4675x11,5/100=538 basófilos

número de linfocitos activados por mm₃ de sangre=  4675x23/100=1075 linfocitos activados

Extensión 2 

• Neutrófilos segmentados: 33, 66%
• Neutrófilos encayados 2, 4%
• Linfocitos: 14, 28%
• Monocitos 0
  
• Eosinofilos 0
• Basofilos: 0
  
• Linfocitos activados: 1, 2%

número de neutrófilos segmentados por mm₃ de sangre= 4675x66/100= 3086 neutrófilos segmentados

número de neutrófilos encayados por mm₃ de sangre=  4675x4/100= 187 neutrófilos encayados

número de linfocitos por mm₃ de sangre=  4675x28/100= 1309 linfocitos

número de linfocitos activados por mm₃ de sangre=  4675x2/100= 94 linfocitos activados

 

Observaciones:

• Utilizar sangre anticoagulada. 
• Homogeneizar la sangre, antes de realizar la extensión.
• Introducir la extensión en las diferentes soluciones, en el orden adecuado, para que la tinción se realice de forma adecuada.
• Observar la zona, haciendo un recorrido en forma de greca o almenas.
• Observar la extensión por el microscopio, en la zona de la extensión adecuada.
• Fijarnos bien al introducir los datos en en el registrador automático de células, para que nos de los porcentajes adecuados de cada leucocito.
• Fijarnos en que el estado del portaobjetos sea el adecuado para realizar la extensión. 
  

Normas de prevención: 

• Utilizar los EPIS correspondientes, para realizar la práctica.
• Depositar los residuos generados durante la realización de la práctica, en los contenedores adecuados.
• Limpiar, desinfectar y esterilizar los materiales utilizados cuando terminos de realizar la práctica. 
• Tener precaución al trabajar con la sangre, para que no nos salpique y pueda entrar en contacto con alguna herida.
  

Actividades

 

 1º ¿Con qué objetivo se observan los leucocitos cuando se determina una fórmula leucocitaria?

Para obtener el porcentaje de cada uno de los leucocitos de la sangre.

2º ¿ Cómo es el recorrido que se describe en la observación leucocitaria?

El recorrido es en forma de almenas o de greca.

3º ¿ Cuándo se han de observar al menos 200 leucocitos?

Cuando se encuentre un mayor número de linfocitos que de neutrófilos, o más de un 10% de eosinófilos o más de un 12% de monocitos.

4º Si de 100 leucocitos 20 son linfocitos y el WBC es igual a 7000 leucocitos/mm₃ de sangre, ¿cuál es el número de linfocitos que hay en 1mm₃ de sangre

nº linfocitos por mm₃ de sangre= 7000 x 20/100=1400 linfocitos por mm₃ de sangre.

5º ¿Cómo se llama el aumento de monocitos?

Monocitosis